CD3/CD28的相關單克隆抗體

CD（Cluster of Differentiation）分子作為在細胞表面的提供靶點的免疫分型表型分子，在T細胞的免疫響應過程中通常以受體或配體的身份存在，通常是一個細胞內信號系統的開端。今天我們要說的CD3和CD28就是CD分子大家庭中的一員。

首先是CD3，作為一個與TCR（T細胞受體）有關的蛋白復合體，CD3能夠與TCR一起激活殺傷T細胞（CD8+ naive T cells）以及輔助T細胞（CD4+ naive T cells）。CD3是由四個不同的鏈組成的，在哺乳動物中共包含1個CD3γ鏈，一個CD3δ 鏈以及兩個CD3ε 鏈。其與TCR具體的組成方式可參照圖1，CD3與TCR以及ζ鏈共同組成TCR復合體。

同時在胞內的CD3γ，CD3δ，CD3ε的尾部都各包含了一個保守的基序，它的名字叫做免疫受體酪氨酸激活基序（ITAM），而在單條ζ鏈的尾部則包含了三個ITAM。免疫細胞活化相關受體胞漿區所共有的以酪氨酸殘基為基礎的氨基酸基序，其中酪氨酸是蛋白激酶磷酸化位點，被磷酸化后，與下游信號分子（ZAP70（Zeta asscoiated protein））結合，導致細胞活化。

再來說說CD28，CD28是表達在T細胞表面能夠提供共刺激信號的蛋白質，對T細胞的活化與生存息息相關。同時作為協同共刺激分子CD80(B7.1)和CD86(B7.2)的受體分子，在抗原呈遞細胞(APC)表面表達CD80與CD86后與CD28相互作用結合，從而將已經被CD3分子傳遞的信號激活后的T細胞刺激使其增殖并分泌相關的白細胞介素和其他細胞因子，具體的三維構象可參照圖2。

對近些年國內的研究進行總結和整理，我們可以發現CD3和CD28的協同免疫性，通常是研究人員的一個關鍵點，其中將CD3單抗與CD28單抗聯用可以促進一些免疫細胞的增殖同時提高免疫細胞對腫瘤的殺傷能力，不但兼具T淋巴細胞的抗瘤活性同時保留了NK細胞的非MHC限制性的對腫瘤細胞的殺傷作用。比如在2006年總醫院輸血科由駱群等人開展了抗CD28抗體協同刺激增強抗CD3抗體體外激活T淋巴細胞并降低TGF-β(腫瘤生長因子beta)的表達的工作，該項工作通過利用抗CD28抗體模擬第二信號協同抗CD3抗體在體外對外周血淋巴細胞進行活化擴增用H-TdR摻入法測定抗體，結果顯示單獨的抗CD28抗體對外周血單核細胞沒有明顯激活活性，但是在抗CD28抗體的協同作用下，抗CD3抗體的激活時間明顯提高。同時抗CD3抗體刺激T淋巴細胞后，能夠介導T淋巴細胞分泌TGF-β，而這種分子在介導體內長期免疫耐受的過程起到關鍵作用。

再有在2016年2月由鄭州大學附屬醫院李玉等人就開展了關于CD3和CD28單克隆抗體聯合作用對細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK）及其亞群增殖及功能影響的相關工作，通過研究發現CD3/CD28聯合作用可以促進干擾素γ（IFN-γ）,腫瘤壞死因子α（TNF-α）的分泌，同時利用磁珠分選檢測各個亞群的細胞因子分泌情況發現CD3/CD28聯合作用可以促進CD8⁺細胞分泌IFN-γ，促進CD56⁺細胞釋放IL-2，TNF-α。

這樣圍繞CD3/CD28的免疫細胞研究不僅能夠直接對抗原呈遞過程進行探索，同時在激活T細胞過程前后其所分泌的各種因子分子做后續的機制構建也是不錯的實驗思路選擇。

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